Prodotti

Wieħed mill-fatturi li jipprevjenu l-applikazzjoni klinika tal-mediċina riġenerattiva għal mard deġenerattiv tal-qarquċa huwa sors xieraq ta 'ċelloli.Il-kondroċiti, l-uniku tip ta 'ċellula ta' qarquċa, imkabbra in vitro taħt kundizzjonijiet ta 'kultura biex jespandu n-numri taċ-ċelluli jitilfu l-fenotip tagħhom flimkien mal-kapaċità li jiġġeneraw tessut kartilaġinuż hyalin.F'dan l-istudju aħna niddeterminaw li sistema ta' kultura tridimensjonali (3D) ħielsa mis-serum u mill-fatturi ta' tkabbir tirrestawra l-abbiltà tal-kondroċiti li jgħaddu mill-passaġġ li jiffurmaw tessut tal-qarquċa in vitro, proċess li jinvolvi sox9.Kondroċiti articular bovini ġew mgħoddija darbtejn għal jippermettu l-espansjoni tan-numru taċ-ċelluli (P2) u kkultivati ​​f'densità għolja fuq membrani miksija bil-collagen-tip II 3D f'medja ta 'kontenut għoli ta' glukożju supplimentati b'insulina u dexamethasone (SF3D).Iċ-ċelloli ġew ikkaratterizzati wara l-espansjoni ta 'monosaff u wara l-kultura 3D permezz ta' ċitometrija tal-fluss, espressjoni tal-ġeni, u istoloġija.Il-bidliet bikrija fil-mogħdijiet tat-trasduzzjoni tas-sinjalar matul ir-ridifferenzjazzjoni ġew ikkaratterizzati. Iċ-ċelloli P2 wrew profil ta 'antiġen bħal proġenitur ta' 99% CD44(+) u 40% CD105(+) u profil ta 'espressjoni tal-ġeni li jissuġġerixxi ċelluli interżona.P2 f'SF3D esprima ġeni kondroġeniċi u matriċi extraċellulari akkumulata.Ir-riċettur ta 'l-insulina li jirregola 'l isfel (IR) b'HNMPA-(AM3) jew il-passaġġ PI-3/AKT kinase (attivat permezz ta' trattament bl-insulina) b'Wortmannin inibixxi s-sinteżi tal-kollaġen.HNMPA-(AM3) naqqas l-espressjoni tal-ġeni Col2, Col11, u IR kif ukoll Sox6 u -9.Analiżi tal-ko-immunopreċipitazzjoni u tal-immunopreċipitazzjoni tal-kromatina taċ-ċelluli ttrattati b'HNMPA-(AM3) wrew rabta tal-koattivaturi Sox6 u Med12 ma' Sox9 iżda naqqas it-twaħħil ta' Sox9-Col2a1. Aħna niddeskrivu metodu ta' kultura ġdid li jippermetti żieda fin-numru ta' kondroċiti u jippromwovi formazzjoni ta 'tessut tal-qarquċa bħal hyalin parzjalment permezz ta' rbit Sox9-Col2a1 medjat mill-insulina.L-adegwatezza tat-tessut iġġenerat permezz ta' dan l-approċċ għall-użu fit-tiswija tal-ġogi jeħtieġ li tiġi eżaminata in vivo.