Prodotti

LecA (PA-IL) huwa lectin u adhesin ċitotossiku prodotti minn Pseudomonas aeruginosa li jorbot galactosides idrofobiċi b'ispeċifiċità u affinità għolja.Bl-użu ta 'fużjoni ta' traduzzjoni lecA-egfp u analiżi immunoblot tal-matriċi extraċellulari tal-bijofilm, nuru li lecA huwa espress f'ċelloli mkabbra bil-bijofilm.F'assaġġi tal-bijofilm statiċi kemm fuq il-polistirene kif ukoll l-istainless steel, il-fond tal-bijofilm u l-kopertura tal-wiċċ tnaqqsu b'mutazzjoni ta 'lecA u mtejba fir-razza li tipproduċi żżejjed LecA PAO-P47.Il-kopertura tal-wiċċ tal-bijofilm mir-razza ġenitur, PAO-P47 iżda mhux il-mutant lecA fuq il-kupuni tal-azzar kienet ukoll inibita minn tkabbir fil-preżenza ta' jew isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) jew p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Barra minn hekk, bijofilms maturi tat-tip selvaġġ iffurmati fin-nuqqas ta 'dawn il-galactosides idrofobiċi jistgħu jiġu mxerrda biż-żieda ta' IPTG.B'kuntrast, iż-żieda ta 'p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) li għandha affinità għolja għal-lecti n P. aeruginosa LecB (PA-IIL) ma kellha l-ebda effett fuq il-formazzjoni jew it-tixrid tal-bijofilm.It-tkabbir planktoniku ta 'P. aeruginosa PAO1 ma kienx affettwat mill-preżenza ta' IPTG, NPG jew NPF, u lanqas ir-razza ma kienet kapaċi tutilizza dawn iz-zokkor bħala sorsi tal-karbonju, li jissuġġerixxi li l-effetti osservati fuq il-formazzjoni tal-bijofilm kienu dovuti għall-inibizzjoni kompetittiva ta 'LecA-ligand vinkolanti.Riżultati simili nkisbu wkoll għal bijofilms imkabbra taħt kundizzjonijiet ta 'fluss dinamiċi fuq kupuni tal-azzar, li jissuġġerixxu li LecA jikkontribwixxi għall-arkitettura tal-bijofilm ta' P. aeruginosa taħt kundizzjonijiet ambjentali differenti.

Alfa-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) li kapaċi tirrilaxxa r-residwu t-fucosyl mill-katina tal-ġenb ta' xyloglucan oligosaccharides ġiet skoperta fil-weraq tal-pjanti Arabidopsis.Barra minn hekk, alpha-L-fucosidase b'ispeċifiċità ta 'sottostrat simili ġiet ippurifikata mill-weraq tal-kaboċċi (Brassica oleracea) biex tirrendi faxxa waħda fuq SDS-PAGE.Żewġ sekwenzi peptidi nkisbu minn din il-faxxa ta 'proteini, u ntużaw biex jidentifikaw ġene Arabidopsis li jikkodifika għal alfa-fucosidase li nipproponu li nsejħu AtFXG1.Barra minn hekk, instab ukoll ġene Arabidopsis b'omoloġija ma 'alpha-L-fucosidases magħrufa, u pproponejna li nsemmuha bħala AtFUC1.Kemm AtFXG1 kif ukoll ATFUC1 ġew espressi b'mod eterologu fiċ-ċelloli Pichia pastoris u l-attivitajiet ta 'alpha-L-fucosidase mnixxija lill-medium tal-kultura.L-alpha-L-fucosidase kodifikata minn AtFXG1 kienet attiva kontra l-oligosaccharides minn xyloglucan XXFG kif ukoll kontra 2'-fucosyl-lactitol iżda mhux kontra p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Madankollu, l-AtFUC1 espress b'mod eterologu kien attiv biss kontra 2'-fucosyl-lactitol.Għalhekk, l-ewwel għandu jkun relatat mal-metaboliżmu ta 'xyloglucan.