Prodotti

Monogalactopyranosides ta' fluorescein u fluorescein methyl ester: sinteżi, idroliżi enżimatika minn β-galactosidase biotnylated, u determinazzjoni tal-koeffiċjent ta' diffużjoni translazzjonali

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) u d-glucopyranoside) u l-ester tal-metil tagħhom (MFMG) ġew ippreparati minn acetobromoglucose/galactose u fluorescein methyl ester f'rendiment tajjeb.Twettqu esperimenti ta 'idroliżi enżimatika (bl-użu ta' β-galactosidase bijotinilat) tad-derivattivi tal-galacto u ġew ikkalkulati parametri kinetiċi.Ġiet osservata żieda ta' 15-20 darba fl-intensità tal-fluworexxenza waqt l-idroliżi.Żieda lineari ta 'fluworexxenza ġiet innutata fi żmien qasir u konċentrazzjoni baxxa ta' sottostrat, li jagħmlu dawn il-komposti sondi utli u sensittivi għal galactosidases.Il-kobor tal-valur tal-kostanti Michaelis–Menten (Km) għall-MFMG huwa ogħla minn dak tal-FMG li jissuġġerixxi bidla konformazzjonali possibbli tas-sottostrat fluworoġeniku.Il-valur Km għal β-Gal bijotinilat b'FMG huwa aktar baxx minn dak għall-enzima nattiva.Din l-osservazzjoni tindika affinità ta 'sottostrat ogħla ta' l-enzima bijotinilata meta mqabbla ma 'l-enzima nattiva.Ġew imkejla koeffiċjenti ta 'diffużjoni translazzjonali, kemm għal sottostrati fluworoġeniċi u kemm għall-prodotti, bl-użu ta' spettroskopija ta 'korrelazzjoni ta' fluworexxenza.Koeffiċjenti ta 'diffużjoni translazzjonali għal sottostrati fluworoġeniċi u l-prodotti ta' idroliżi enżimatika ġew imkejla li huma simili, fil-medda ta '3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1.Għalhekk titjib jew ritardazzjoni tal-kinetika enżimatika minħabba differenza fil-mobilità translazzjonali tas-sottostrat u l-prodott mhuwiex daqshekk evidenti.