Prodotti

X-gal (imqassar ukoll BCIG għal 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) huwa kompost organiku li jikkonsisti f'galattożju marbut ma' indol sostitwit.Il-kompost ġie sintetizzat minn Jerome Horwitz u kollaboraturi fl-1964. L-isem kimiku formali spiss jitqassar għal frażijiet inqas preċiżi iżda wkoll inqas ingombranti bħal bromochloroindoxyl galactoside.L-X minn indoxyl jista 'jkun is-sors tal-X fil-kontrazzjoni X-gal.X-gal spiss jintuża fil-bijoloġija molekulari biex jittestja l-preżenza ta 'enzima, β-galactosidase, fil-post tal-mira tas-soltu tiegħu, β-galactoside.Jintuża wkoll biex jikxef l-attività ta 'din l-enzima fl-istokimika u l-batteroloġija.X-gal huwa wieħed minn ħafna glikosidi u esteri ta 'indoxyl li jipproduċu komposti blu li ma jinħallux simili għal żebgħa indigo bħala riżultat ta' idroliżi katalizzata bl-enżimi.

X-gal huwa analogu tal-lattożju, u għalhekk jista 'jiġi idrolizzat mill-enzima β-galactosidase li taqsam ir-rabta β-glycosidic fid-D-lactose.X-gal, meta maqtugħ minn β-galactosidase, jagħti galactose u 5-bromo-4-chloro-3-hydroxyindole - 1. Dan tal-aħħar imbagħad dimerizes spontanjament u jiġi ossidizzat f'5,5'-dibromo-4,4'-dichloro -indigo - 2, prodott blu intens li ma jinħallx.X-gal innifsu huwa bla kulur, għalhekk il-preżenza ta 'prodott ikkulurit blu tista' għalhekk tintuża bħala test għall-preżenza ta 'β-galactosidase attiva.Dan jippermetti wkoll li β-galactosidase batterjali (hekk imsejħa lacZ ) tintuża bħala reporter f'diversi applikazzjonijiet.

F'analiżi ta 'żewġ ibridi, β-galactosidase jista' jintuża bħala reporter biex jidentifika proteini li jinteraġixxu ma 'xulxin.F'dan il-metodu, il-libreriji tal-ġenoma jistgħu jiġu skrinjati għall-interazzjoni tal-proteini bl-użu ta 'ħmira jew sistema batterjali.Fejn ikun hemm interazzjoni b'suċċess bejn il-proteini li jkunu qed jiġu skrinjati, dan jirriżulta fl-irbit ta' dominju ta' attivazzjoni ma' promotur.Jekk il-promotur ikun marbut ma 'ġene lacZ, il-produzzjoni ta' β-galactosidase, li tirriżulta fil-formazzjoni ta 'kolonji pigmentati blu fil-preżenza ta' X-gal, għalhekk tindika interazzjoni ta 'suċċess bejn il-proteini.Din it-teknika tista 'tkun limitata għal libreriji ta' screening ta 'daqs ta' inqas minn madwar 106.Il-qsim b'suċċess ta 'X-gal joħloq ukoll riħa ħażina notevoli minħabba l-volatilizzazzjoni ta' indole.

Billi X-gal innifsu huwa bla kulur, il-preżenza ta' prodott ta' kulur blu tista' tintuża bħala test għall-preżenza ta' β-galactosidase attiva.

Din l-identifikazzjoni faċli ta 'enżima attiva tippermetti li l-ġene għal βgalactosidase (il-ġene lacZ) jintuża bħala ġene reporter f'diversi applikazzjonijiet.