Prodotti

Il-melħ Tris acetate spiss jintuża fil-preparazzjoni tal-buffer TAE (Tris-acetate-EDTA), li jintuża bħala buffer tal-ġiri u f'ġels tal-agarose.Il-buffer Tris Acetate-EDTA jintuża għall-elettroforesi tal-ġell tal-agarose tad-DNA iżda jintuża wkoll għall-elettroforeżi tal-ġel tal-agarose RNA mhux denaturanti.Id-DNA doppju għandu t-tendenza li jaħdem aktar malajr f'TAE milli f'buffers oħra u jista' jiġi eżawrit waqt l-elettroforeżi estiża.Iċ-ċirkolazzjoni tal-buffer jew is-sostituzzjoni tal-buffer waqt l-elettroforeżi estiża jistgħu jirrimedjaw il-kapaċità ta 'buffering aktar baxxa.Jista 'jintuża f'diversi konċentrazzjonijiet biex tistudja l-mobilità tad-DNA fis-soluzzjoni.Peress li l-borat fil-buffer TBE (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) huwa inibitur qawwi għal ħafna enzimi, il-buffer TAE huwa rakkomandat meta tħares lejn applikazzjonijiet enżimatiċi għall-kampjun tad-DNA.Il-melħ Tris acetate huwa wkoll buffer b'sensittività għolja f'assaġġi ATP b'luċiferażi firefly.

Użi: TAE running buffer huwa l-aktar buffer użat komunement għall-elettroforeżi tal-ġell tal-agarose tad-DNA, u jintuża wkoll għall-elettroforeżi tal-ġel tal-agarose RNA nattiv.Id-DNA bi strand doppju għandu tendenza li jiċċaqlaq aktar malajr f'TAE milli f'buffers oħra, iżda wkoll jonqos milli jgħum minħabba t-tnaqqis tal-jonji buffer waqt elettroforeżi fit-tul.Iċ-ċikliżmu tal-buffer jew l-iskambju tal-buffer waqt elettroforeżi fit-tul jistgħu jikkumpensaw għall-kapaċità tal-buffer aktar baxxa.2 Iddilwa l-buffer TAE konċentrat biex tikseb 1 mMTAE buffer li jkun fih 40 mM Tris acetate u 1 mM EDTA, pH 8.3.1 mMTAE buffer jista 'jintuża kemm f'ġels ta' agarose kif ukoll bħala buffer li jaħdem.Għal riżoluzzjoni massima, huwa rakkomandat li l-vultaġġ applikat ikun inqas minn 5V/ċm (distanza bejn l-elettrodi tal-unità).

Applikazzjoni: TAE running buffer huwa l-aktar buffer użat komunement għall-elettroforeżi tal-ġell tal-agarose tad-DNA fil-ġel Chemicalbook, u jintuża wkoll għall-elettroforeżi tal-ġel tal-agarose RNA mhux denaturant.Id-DNA bi strand doppju għandu tendenza li jiċċaqlaq aktar malajr f'TAE milli f'buffers oħra, iżda wkoll jonqos milli jgħum minħabba t-tnaqqis tal-jonji buffer waqt elettroforeżi fit-tul.Iċ-ċikliżmu tal-buffer jew l-iskambju tal-buffer waqt elettroforeżi fit-tul jistgħu jikkumpensaw għall-kapaċità tal-buffer aktar baxxa.Il-buffer TAE konċentrat ġie dilwit biex jinkiseb 1 mMTAE buffer li fih 40 mM Tris acetate u 1 mM EDTA, pH 8.3.1 mMTAE buffer jista 'jintuża kemm f'ġels ta' agarose kif ukoll bħala buffer li jaħdem.Għal riżoluzzjoni massima, huwa rakkomandat li l-vultaġġ applikat ikun inqas minn 5V/ċm (distanza bejn l-elettrodi tal-unità).

Użi: Fl-iskoperta ta 'ATP b'luċiferażi firefly, dan il-prodott huwa l-aktar buffer sensittiv;sejbien tal-irbit tal-glutamate.

L-irbit li jista 'jiġi spostat ta' [3H]l-aċidu glutamiku ma' materjali mhux riċetturi.

L-irbit ta 'l-aċidu L-glutamiku ma' tubi microfuge u ħġieġ ġie investigat f'erba 'buffers.L-irbit ta 'l-isfond ma' dawn il-materjali kien negliġibbli, iżda żdied biċ-ċentrifugazzjoni jew ġbid fi Tris-HCl u Tris-citrate buffer.Dan l-irbit kien ħafna inqas jew Meta HEPES-KOH, jew buffer Tris-acetate intuża minflok.[3H] L-irbit ta 'L-glutamate ma' tubi microfuge kien inibit minn L- iżda mhux D-isomeri ta 'glutamate u aspartate.L-aċidu DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic lanqas ma inibixxi l-irbit.Komposti oħra li wrew inibizzjoni baxxa għal moderata kienu: N-methyl-D-aspartate, quisqualate, L-glutamic acid diethyl ester, N-methyl-L-aspartate, kainate, u 2-amino-4 -phosphonobutyrate.L-irbit kien inibit minn membrani tal-moħħ tal-firien żnaturati.Twaħħil [3H]glutamate dipendenti fuq il-proteini inkiseb bi preparazzjoni tal-membrana ffriżata u mdewba ripetutament meta t-twaħħil sar fil-buffer Tris-acetate.Huwa rakkomandat li Tris-acetate jew HEPES -KOH buffer għandhom jintużaw fl-assaġġ tal-glutamate bin ding.Jekk jintuża buffer Tris-HCl jew Tris-citrate, għandu jsir esperiment ta 'kontroll xieraq biex jikkoreġi għat-twaħħil ma' tubi microfuge jew filtri tal-fibra tal-ħġieġ.