Prodotti

Simili għal viruses RNA pożittivi oħra, tombusviruses huma replikati mill-kumpless ta' replicase virali marbut mal-membrana (VRC).Il-VRC jikkonsisti mill-RNA polymerase dipendenti fuq l-RNA kodifikat mill-virus p92 (RdRp), il-viral p33 RNA chaperone, u diversi proteini ospitanti co-opted.Sabiex issir RdRp funzjonali wara t-traduzzjoni tagħha, il-proteina ta' replikazzjoni p92 għandha tiġi inkorporata fil-VRC, segwita mill-attivazzjoni tagħha.Preċedentement urejna f'assaġġ ibbażat fuq l-estratt tal-ħmira mingħajr ċelluli li l-attivazzjoni tal-RdRp Tomato bushy stunt virus (TBSV) teħtieġ fattur(i) ospitanti solubbli.F'dan l-artikolu, aħna nidentifikaw il-proteina ta 'xokk tas-sħana ċellulari 70 (Hsp70) bħala l-fattur ospitanti coopted meħtieġ għall-attivazzjoni ta' TBSV RdRp rikombinanti maqtugħ N-terminalment.Barra minn hekk, l-imblukkar ibbażat fuq molekuli żgħar tal-funzjoni Hsp70 jinibixxi s-sintesi tal-RNA mill-tombusvirus RdRp in vitro.Barra minn hekk, nuru li fosfolipidi newtrali, jiġifieri, phosphatidylethanolamine (PE) u phosphatidylcholine (PC ), itejbu l-attivazzjoni RdRp in vitro.B'kuntrast, phosphatidylglycerol (PG) juri effett inibitorju qawwi u dominanti fuq l-attivazzjoni RdRp in vitro.Aħna nuru wkoll li l-PE u l-PC jistimulaw l-interazzjoni RdRp-virali plus-strand RNA [(+)RNA], filwaqt li PG jinibixxi l-irbit tal-RNA virali mal-RdRp.Ibbażat fuq ir-rwoli stimulatorji versus inibitorji ta 'diversi fosfolipidi fl-attivazzjoni ta' tombusvirus RdRp, nipproponu li l-kompożizzjoni tal-lipidi ta 'membrani subċellulari mmirati tista' tiġi utilizzata minn tombusviruses biex tirregola assemblaġġ VRC ġdid matul il-kors tal-infezzjoni. (RdRp), li hija responsabbli għas-sintetizza tal-proġeni tal-RNA virali f'ċelloli infettati ta 'diversi viruses tal-RNA ta' linja pożittiva, hija inizjalment inattiva.Din l-istrateġija x'aktarx tevita s-sinteżi ta 'RNA virali fiċ-ċitosol li twassal malajr għal induzzjoni ta' risponsi antivirali ċellulari attivati ​​mill-RNA.Matul l-assemblaġġ tal-kumpless ta 'replikase marbut mal-membrana, l-RdRp virali jiġi attivat permezz ta' proċess li ma jinftiehemx kompletament li jagħmel l-RdRp kapaċi għas-sintesi ta 'RNA.Bl-użu ta 'TBSV RdRp, nuru li l-chaperon Hsp70 ċellulari coopted u l-fosfolipidi newtrali jiffaċilitaw l-attivazzjoni ta' RdRp in vitro.B'kuntrast, phosphatidylglycerol (PG) għandu effett inibitorju dominanti fuq l-attivazzjoni RdRp in vitro u l-interazzjoni RdRp-virali RNA, li jissuġġerixxi li l-mikrodominju membranuż li jdawwar l-RdRp jaffettwa ħafna l-abbiltà tiegħu għas-sintesi ta 'RNA.Għalhekk, l-attivazzjoni tal-RdRp virali x'aktarx tiddependi fuq komponenti ospitanti multipli f'ċelloli infettati.