Prodotti

1.Il-metodi ta 'profiling ta' metaboliti huma għodod importanti għall-kejl ta 'pools ta' metaboliti f'sistemi bijoloġiċi.Filwaqt li l-biċċa l-kbira tal-metodi tal-profil tal-metaboliti jirrappurtaw intensitajiet relattivi jew jiddependu fuq ftit standards interni li jirrappreżentaw il-metaboliti kollha, ir-rekwiżit aħħari għal deskrizzjoni kwantitattiva tal-ġabra tal-metaboliti fiċ-ċelloli u fluwidi bijoloġiċi huwa d-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni assoluta.Aħna nirrapportaw hawn metodu ta 'profiling ta' metabolit immirat ta 'kromatografija tal-gass/tandem tal-massa (GC/MS/MS) sensittiva u ta' produzzjoni għolja li tippermetti kwantifikazzjoni assoluta tal-metaboliti kollha skoperti.Il-metodu huwa bbażat fuq derivatizzazzjoni u kwantifikazzjoni tal-kloroformat tal-metil billi tispikka kampjuni bi standards tal-metaboliti derivatizzati separatament b'reaġenti ta' derivatizzazzjoni dewterati.L-jonizzazzjoni tradizzjonali ta 'l-impatt ta' l-elettroni hija sostitwita b'jonizzazzjoni kimika pożittiva peress li din ta 'l-aħħar sa punt ferm akbar tippreserva l-jone molekulari u frammenti oħra ta' piż molekulari għoli.Dan għamilha aktar faċli li jintgħażlu tranżizzjonijiet MS/MS uniċi fost il-ħafna metaboliti coeluting.Bħalissa, il-metodu ġdid GC/MS/MS jinkludi 67 metabolit primarju komuni li l-biċċa l-kbira tagħhom jappartjenu għall-gruppi ta 'aċidi organiċi amino u nonamino.Aħna nuru l-applikabilità tal-metodu fuq kampjuni tal-awrina u tas-serum.Il-metodu huwa titjib sinifikanti tal-metodoloġija preżenti għall-profili kwantitattivi tal-metaboliti GC/MS ta 'aċidi amminiċi u aċidi organiċi nonamino.

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) u 27-hydroxycholesterol (27OHC) huma żewġ ossisteroli strutturalment simili ta 'oriġini differenti - l-ewwel kważi esklussivament iffurmat fil-moħħ u l-aħħar iffurmat sa ċertu punt fil-moħħ milli fil-biċċa l-kbira ta' organi oħra.IPOTESI LI GĦANDHA TIĠI TTESTJATA: Ħsara newronali u/jew demyelination tikkawża żieda fil-fluss ta' 24OHC mill-moħħ fil-fluwidu ċerebrospinali (CSF), filwaqt li difett barriera tad-demm-moħħ tikkawża żieda fil-fluss ta' 27OHC miċ-ċirkolazzjoni fis-CSF. Massa ta' dilwizzjoni tal-isotopi l-ispettrometrija ntużat biex jiġu analizzati ż-żewġ ossisteroli f'CSF u fil-plażma minn aktar minn 250 pazjent b'mard newroloġiku u ġerjatriku differenti. Il-livelli tas-CSF taż-żewġ ossisteroli kienu ħafna aktar affettwati mill-mard differenti mill-livelli tal-plażma.Pazjenti b'mard demyelinating attiv kellhom livelli miżjuda ta' 24OHC f'CSF bi proporzjon ta' 24OHC/27OHC relattivament għoli.Pazjenti b'meninġite b'mod ġenerali kellhom livelli għoljin taż-żewġ sterojdi bi proporzjon baxx ta' 24OHC/27OHC.Pazjenti bil-marda ta 'Alzheimer kellhom livelli kemmxejn miżjuda ta' 24OHC fis-CSF b'inqas żieda f'27OHC.Pazjenti bi sklerożi multipla kellhom tendenza li jkollhom livelli ogħla ta '24OHC matul perjodi attivi bi proporzjon għoli ta' 24OHC/ 27OHC. Il-kejl taż-żewġ ossisteroli fis-CSF u fil-plażma jista 'jżid b'mod sinifikanti mal-metodi bijokimiċi eżistenti għall-evalwazzjoni ta' mard newroloġiku.